ภาพรวม

การตรวจหาการแสดงออกของ PD-L1 ด้วยโคลน SP263 ใช้การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีเพื่อแสดงโปรตีน PD-L1 บนส่วนของเนื้องอกที่ตรึงด้วยฟอร์มาลินและฝังในพาราฟิน แอนติบอดี SP263 เป็นรีเอเจนต์โมโนโคลนอลของกระต่ายที่พัฒนาขึ้นสำหรับแพลตฟอร์มการย้อมสีอัตโนมัติของ VENTANA และทำหน้าที่เป็นเครื่องมือวินิจฉัยร่วมที่ช่วยในการพิจารณาคุณสมบัติสำหรับยาภูมิคุ้มกันยับยั้งหลายชนิด การทำความเข้าใจหลักการของชุดตรวจจะช่วยชี้แจงว่าเหตุใดผลลัพธ์จึงถูกรายงานเป็นสัดส่วนของเซลล์ที่ย้อมสี แทนที่จะเป็นการระบุว่าผลบวกหรือลบอย่างง่าย

หลักการย้อมสี

วิธีการเริ่มต้นด้วยการใช้แอนติบอดีต่อต้าน PD-L1 กับสไลด์เนื้อเยื่อบางๆ ซึ่งจะจับกับโปรตีน PD-L1 ที่แสดงออกบนเยื่อหุ้มเซลล์ จากนั้นระบบตรวจจับรองจะปล่อยสารสีที่ทำให้บริเวณที่จับกันปรากฏเป็นสีน้ำตาลที่มองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เนื่องจาก PD-L1 อยู่บนพื้นผิวเซลล์ การให้คะแนนจึงมุ่งเน้นไปที่การย้อมสีที่เยื่อหุ้มเซลล์ และความเข้มจะถูกตีความเทียบกับเกณฑ์ที่ตรวจสอบแล้ว แทนที่จะประเมินด้วยสายตาเพียงอย่างเดียว

การอ่านคะแนนสัดส่วนของเนื้องอก

พยาธิแพทย์ประเมินเปอร์เซ็นต์ของเซลล์เนื้องอกที่ยังมีชีวิตซึ่งแสดงการย้อมสีที่เยื่อหุ้มเซลล์บางส่วนหรือทั้งหมด ซึ่งเป็นแนวทางที่เรียกว่าคะแนนสัดส่วนของเนื้องอก การอ้างสิทธิ์การวินิจฉัยร่วมที่แตกต่างกันใช้เกณฑ์ที่แตกต่างกัน ตัวอย่างเช่น atezolizumab ในมะเร็งปอดชนิดเซลล์ไม่เล็กเชื่อมโยงกับเกณฑ์อย่างน้อยหนึ่งเปอร์เซ็นต์ของการย้อมสีเซลล์เนื้องอก ในขณะที่ cemiplimab ในข้อบ่งชี้บางอย่างใช้เกณฑ์เซลล์เนื้องอกที่สูงกว่า ดังนั้น ชุดตรวจ SP263 เดียวกันจึงสามารถรองรับการตัดสินใจเกี่ยวกับภูมิคุ้มกันบำบัดได้หลายอย่าง ขึ้นอยู่กับกฎการให้คะแนนที่ตรวจสอบแล้วที่นำมาใช้

เหตุใดการเลือกโคลนจึงมีความสำคัญ

ชุดตรวจ PD-L1 ไม่สามารถใช้แทนกันได้ เนื่องจากแอนติบอดีโคลนแต่ละตัวจะจดจำเอพิโทปที่แตกต่างกันเล็กน้อย และแต่ละแพลตฟอร์มมีเคมีภัณฑ์การย้อมสีของตนเอง ห้องปฏิบัติการควรรายงานโคลนและอัลกอริทึมการให้คะแนนที่ใช้ให้ถูกต้อง เพื่อให้แพทย์สามารถจับคู่ผลลัพธ์กับฉลากยาที่ถูกต้องได้ ขั้นตอนการทำงานที่เป็นมาตรฐานและมีการจัดทำเอกสารอย่างชัดเจนจะช่วยปกป้องความหมายทางคลินิกของคะแนนในทุกไซต์

ปัจจัยก่อนการวิเคราะห์ที่มีผลต่อคะแนน

คุณภาพของตัวอย่างมีอิทธิพลอย่างมากต่อคะแนน PD-L1 การตรึงที่นานเกินไปหรือสั้นเกินไปอาจเปลี่ยนแปลงการคงอยู่ของแอนติเจนบนเยื่อหุ้มเซลล์ และปริมาณเนื้องอกที่ไม่ดีทำให้มีเซลล์น้อยเกินไปที่จะให้คะแนนได้อย่างน่าเชื่อถือ ห้องปฏิบัติการควรกำหนดเวลาการตรึงที่ยอมรับได้และพื้นที่เนื้องอกขั้นต่ำก่อนการย้อมสี และทำเครื่องหมายตัวอย่างที่อยู่นอกขีดจำกัดเหล่านั้น ผลลัพธ์ที่รายงานพร้อมบริบทก่อนการวิเคราะห์จะน่าเชื่อถือมากกว่าตัวเลขที่ออกโดยไม่มีข้อแม้

คำถามที่พบบ่อย

ถาม: SP263 วัดอะไรกันแน่?ตอบ: วัดโปรตีน PD-L1 บนเยื่อหุ้มเซลล์ในส่วนของเนื้อเยื่อโดยการย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีแบบโครโมเจนิก แสดงเป็นสัดส่วนของเซลล์เนื้องอกที่ย้อมสี

ถาม: การทดสอบ PD-L1 ทั้งหมดสามารถใช้แทนกันได้หรือไม่?ตอบ: ไม่ แอนติบอดีโคลนและแพลตฟอร์มที่แตกต่างกันได้รับการตรวจสอบแยกกัน ดังนั้นโคลนและกฎการให้คะแนนที่รายงานจะต้องตรงกับการรักษาที่ตั้งใจไว้

ถาม: เหตุใดผลลัพธ์จึงเป็นเปอร์เซ็นต์แทนที่จะเป็นใช่หรือไม่?ตอบ: การอ้างสิทธิ์การวินิจฉัยร่วมจะผูกติดกับเกณฑ์สัดส่วน ดังนั้นคะแนนจะต้องสะท้อนว่าเซลล์เนื้องอกกี่เซลล์ที่แสดงเครื่องหมาย