ภาพรวม

การตรวจวิเคราะห์การแสดงออกของยีน PD-L1 จากเลือดใช้เทคนิค Fluorescence Quantitation PCR เพื่อตรวจวัดสัญญาณ PD-L1 จากตัวอย่างเลือด ซึ่งเป็นแนวทางที่อยู่ภายใต้การควบคุมโดยการตรวจสอบความใช้ได้ของการทดสอบและกฎระเบียบการรายงานผลที่เข้มงวด บทความนี้ครอบคลุมกรอบการทำงานด้านกฎระเบียบและคุณภาพที่อยู่เบื้องหลังระเบียบวิธี PCR จาก GIVE LIFE TIME International กระบวนการ PCR ที่มีการควบคุมเป็นอย่างดีคือสิ่งที่ทำให้ผลการอ่านค่าจากเลือดมีความน่าเชื่อถือ

หลักการทำงาน

กรดนิวคลีอิกอิสระในพลาสมา (Cell-free nucleic acids) จะถูกเพิ่มจำนวนโดยใช้เทคนิค Quantitative PCR ที่ใช้สารเรืองแสง และตรวจวัดปริมาณการแสดงออกของ PD-L1 เทียบกับสารมาตรฐานที่สอบเทียบแล้ว การควบคุมภายใน (Internal controls) จะตรวจสอบประสิทธิภาพการเพิ่มจำนวนเพื่อให้ผลลัพธ์เป็นไปตามขีดจำกัดความแม่นยำที่กำหนด แต่ละเพลทจะได้รับการยอมรับหรือปฏิเสธโดยขึ้นอยู่กับประสิทธิภาพของตัวควบคุมก่อนที่จะออกผล

ข้อบ่งชี้

ใช้เพื่อสนับสนุนการตัดสินใจในการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันบำบัด การติดตามการเปลี่ยนแปลงของระดับ PD-L1 และในกรณีที่ไม่สามารถทำการเจาะตรวจชิ้นเนื้อเยื่อได้ แพทย์ใช้ผลการอ่านค่าจากเลือดเป็นส่วนเสริมของการตรวจอิมมูโนฮิสโตเคมี (Immunohistochemistry) จากชิ้นเนื้อ การเจาะเลือดตรวจเป็นชุดต่อเนื่องช่วยติดตามการเปลี่ยนแปลงของการแสดงออกระหว่างการรักษา

สิ่งส่งตรวจและการเตรียมตัวอย่าง

เก็บตัวอย่างเลือดปริมาณ 5 ถึง 10 มิลลิลิตรในหลอดเก็บเลือดชนิด EDTA หรือหลอดรักษาสภาพ Cell-free DNA และนำไปประมวลผลทันทีเพื่อรักษาเสถียรภาพของกรดนิวคลีอิกในกระแสเลือด พลาสมาจะถูกแยกออกและเพิ่มจำนวนยีนเป้าหมายด้วยวิธี Quantitative PCR มีการบันทึกระยะเวลาก่อนการวิเคราะห์เพื่อความสามารถในการตรวจสอบย้อนกลับ เอกลักษณ์ของตัวอย่างได้รับการยืนยันในทุกขั้นตอนของการส่งต่อ และสารตัวอย่างที่เหลือจากกระบวนการทำงานที่เน้นการปฏิบัติตามกฎระเบียบจะถูกเก็บรักษาไว้สำหรับทางเลือกในการวิเคราะห์ซ้ำเพื่อยืนยันผล

การจัดเก็บและแหล่งที่มา

รายงานผลจะออกเป็นไฟล์ PDF ที่มีความปลอดภัยภายใน 3 ถึง 5 วันทำการ โดยระบุค่าเชิงปริมาณและสถานะของตัวควบคุม GIVE LIFE TIME International ดำเนินการทดสอบภายใต้ขั้นตอนที่มีการบันทึกเป็นเอกสาร พร้อมบันทึกการตรวจสอบระดับรุ่นการผลิต (Batch-level) และการเข้าร่วมการประเมินคุณภาพจากภายนอก พอร์ทัลสำหรับลูกค้าสามารถแสดงรายงานได้หลายภาษาสำหรับโปรแกรม PD-L1 และรองรับการส่งออกข้อมูลจำนวนมากไปยังระบบสารสนเทศของโรงพยาบาล

คำถามที่พบบ่อย

ถาม: การทดสอบ PCR ได้รับการตรวจสอบความใช้ได้สำหรับการใช้งานทางคลินิกอย่างไร? ตอบ: ความเป็นเส้นตรง ขีดจำกัดในการตรวจหา และความสามารถในการทำซ้ำได้รับการกำหนดขึ้นโดยเทียบกับสารมาตรฐานที่สอบเทียบแล้วก่อนที่การทดสอบจะเข้าสู่การให้บริการตามปกติ และจะมีการตรวจสอบความใช้ได้ใหม่อีกครั้งหลังจากการเปลี่ยนแปลงน้ำยาใดๆ

ถาม: ผลตรวจจากเลือดสามารถใช้แทนการตรวจ PD-L1 ทางอิมมูโนฮิสโตเคมีจากชิ้นเนื้อได้หรือไม่? ตอบ: เป็นการตรวจเสริมมากกว่าการทดแทนการย้อมชิ้นเนื้อ โดยให้ผลการอ่านค่าจากของเหลวที่สามารถทำซ้ำได้เมื่อไม่มีชิ้นเนื้อ การตัดสินใจยังคงต้องพิจารณาภาพรวมทางคลินิกทั้งหมดร่วมด้วย

ถาม: การวัดเชิงปริมาณมีความแม่นยำในระดับใด? ตอบ: การวัดเชิงปริมาณจะรายงานพร้อมกับค่าสัมประสิทธิ์ความแปรปรวน (Coefficient of variation) ที่กำหนดไว้ของการทดสอบ ซึ่งได้รับการสนับสนุนจากการควบคุมคุณภาพระหว่างรอบการทดสอบ (Run-to-run) ทั้งนี้ความแม่นยำที่ระบุจะปรากฏอยู่ในทุกรายงานผล

ถาม: มีการตรวจควบคุมคุณภาพใดบ้างในแต่ละรุ่นการทดสอบ? ตอบ: มีการทดสอบตัวควบคุมผลลบ ผลบวกระดับต่ำ และผลบวกระดับสูง พร้อมทั้งยีนอ้างอิงภายในในทุกเพลท เพื่อยืนยันความถูกต้องของการเพิ่มจำนวน หากตัวควบคุมไม่ผ่านเกณฑ์จะมีการระงับการออกผลของผู้ป่วย