PCR ดิจิตอลสําหรับ EGFR T790M และ C797S: ติดตามความต้านทานลําดับหลังจากการรักษา TKI

ภาพรวม

ความต้านทานต่อการรักษาที่กํากับโดย EGFR มีแนวโน้มที่จะมาในลําดับที่คาดเดาได้ และการวัดนี้ถูกสร้างขึ้นโดยรอบลําดับนั้น T790M ปรากฏขึ้นอย่างคลาสสิกภายใต้ความกดดันของสารยับยั้งรุ่นก่อนขณะที่ C797S ปรากฏขึ้นหลังจากที่เอเย่นต์รุ่นที่สามถูกใช้ต่อต้าน T790Mการเป้าหมายทั้งสองการแทนที่ในปฏิกิริยาที่มีความรู้สึกสูงหนึ่ง เปลี่ยนความรู้สึกทางคลินิกที่ไม่ชัดเจนของการพัฒนาเป็นกลไกการหลบหนีที่มีชื่อ

วิธี การ

พีซีอาร์ดิจิตอลแบ่งตัวอย่างที่เตรียมพร้อมไว้เป็นตัวอย่างเดียว ผ่านหลายพันส่วนแยกที่อิสระ ก่อนที่จะเริ่มการขยายดังนั้นหลังจากจักรยานเครื่องมือนับส่วนบวกและใช้สถิติพอยสันเพื่อกําเนิดจํานวนโมเลกุลที่สมบูรณ์แบบ โดยไม่ต้องอ้างอิงไปยังเส้นโค้งมาตรฐานหน่วยตรวจสอบเฉพาะแอลเล่ จะแยกความสืบสานของมิวเทนต์ จากพื้นฐานแบบป่าที่มากมาย การแบ่งแยกนั้นคือสิ่งที่ทําให้แอลเล่ที่มีความต้านทานหายากซึ่งมีความสําคัญ เพราะคลอนหลบหนีมักเป็นส่วนเล็กๆ ของวัสดุที่ไหลเวียนในขณะที่การพัฒนาจะเห็นได้ทางการแพทย์.

อาการ

การทดสอบนี้เหมาะสําหรับผู้ป่วยที่กําลังปรับปรุงการรักษาที่กํากับโดย EGFR โดยที่กลไกการหลบหนีต้องถูกตั้งชื่อ ก่อนการเลือกเส้นต่อไป พลาสมาเป็นเมทริกซ์ปกติเมื่อการทําชีวภาพใหม่ไม่เป็นไปได้และเนื้อเยื่อสามารถใช้ได้เมื่อตัวอย่างสดได้มันยังสนับสนุนการเก็บตัวอย่างลําดับตลอดการรักษา เนื่องจากการนับสมบูรณ์แบบอนุญาตให้มีการเปรียบเทียบระหว่างการดึงแทนการถ่ายภาพเพียงครั้งเดียวเนื่องจากการหลั่งน้ําแตกต่างกันดังนั้นการยืนยันเนื้อเยื่อยังคงเหมาะสมเมื่อภาพคลินิกไม่ตรงกัน

รายละเอียดและการรายงาน

ยืนยันปริมาณเลือดที่ต้องการ ขีดจํากัดการตรวจพบที่แสดงออกมาเป็นส่วนของแอลเลลที่กลายพันธุ์ และจํานวนสําเนา DNA ที่ถูกสอบถามต่อปฏิกิริยารายงานควรให้จํานวนพันธุ์กลายพันธุ์และชนิดป่าที่สมบูรณ์แบบ พร้อมกับส่วน, ระบุชื่อการแทนแต่ละตัวแยก และบันทึกว่าข้อมูล input ต่ํากว่าขั้นต่ําที่รับรองหรือไม่

การจัดเก็บและการจัดหา

การทํางานของพลาสมาถูกกํากับโดยเวลา เลือดที่ดึงเข้าไปในท่อ EDTA มาตรฐานต้องบรรลุการแยกภายในหน้าต่างที่กําหนดไว้สั้นๆเนื่องจากการแตกแยกของหลอดเลือดขาวน้ําท่วมตัวอย่างด้วย DNA แบบป่าและฝังสัญญาณกล่องที่ทําให้เซลล์มั่นคงขยายช่องนั้น และคุ้มค่าค่าของมัน ผ่านเครือข่ายการรวบรวมที่แพร่หลาย พลาสมาที่แยกแยกถูกเก็บไว้ในระบบแข็งโปรแกรมการส่งสารที่เขียนและระยะเวลาในการดึง-แยกที่บันทึกไว้สําคัญมากกว่าสําหรับการทดสอบที่ใช้เนื้อเยื่อ.

FAQ

ถาม: ทําไมต้องเลือก PCR ผ่านระบบดิจิตอล แทนที่ใช้แผ่นเรียงลําดับที่กว้างขวาง เมื่อสงสัยว่ามีความต้านทาน?เมื่อคําถามคือการแทนที่ที่รู้จักกันอยู่หรือไม่ การนับพาร์ติชั่นจะบรรลุขั้นต่ําการตรวจจับและกลับมาเร็วกว่าการเรียงลําดับที่กว้างเลือกแผ่นกว้างแทนเมื่อเส้นทางการหลบหนีที่ไม่ทราบจริง ๆ.

ถาม: การค้นพบ C797S แสดงว่าอะไรต่อการรักษาสายต่อไป?มันชี้ว่าการหลบหนีได้เกิดขึ้นที่จุดผูกพันที่เป้าหมายโดยสารยับยั้งรุ่นที่สาม ดังนั้นการดําเนินการด้วยสารเดียวกันไม่น่าจะเป็นประโยชน์ผลลัพธ์ควรถูกพิจารณาโดยใช้แนวทางการรักษาปัจจุบัน แทนที่จะพิจารณาเป็นคําแนะนําการสั่งยา.

ถาม: พลาสมาต้องถึงห้องทดลองเร็วแค่ไหน เพื่อให้ DNA ที่ไหลเวียนอยู่ใช้ได้?กับการรวบรวม EDTA แบบมาตรฐาน ระยะระหว่างการดึงและการแยกจะวัดเป็นชั่วโมง ไม่ใช่วันยืนยันหน้าต่างที่ระบุของผู้ให้บริการและยืนยันตัวส่งของท่านกับมัน ก่อนที่จะผูกพันสถานที่เก็บของกับการทํางาน.