ภาพรวม

การทดสอบ PD-L1 immunohistochemistry (IHC) ที่พัฒนาขึ้นในห้องปฏิบัติการโดยใช้แอนติบอดี monoclonal กระต่าย Cell Signaling Technology (CST) E1L3N ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในกรณีที่ไม่จำเป็นต้องมีการวินิจฉัยคู่หูที่ได้รับการอนุมัติจากหน่วยงานกำกับดูแล ประโยชน์ทางคลินิกของผล PD-L1 ใดๆ จะลดลงหากการย้อมสีแตกต่างกันไปในแต่ละเครื่องมือ ชุด หรือผู้ปฏิบัติงาน สำหรับผู้จัดจำหน่ายและทีมจัดซื้อของห้องปฏิบัติการอ้างอิง ข้อโต้แย้งทางการค้าสำหรับ E1L3N ขึ้นอยู่กับการทำซ้ำข้ามแพลตฟอร์ม การสอบเทียบกับโคลนอ้างอิง และสถาปัตยกรรมควบคุมคุณภาพ CAP/CLIA ที่รักษาข้อตกลงระหว่างห้องปฏิบัติการให้อยู่ในขอบเขต

การสอบเทียบแพลตฟอร์มและความสอดคล้องระหว่างเครื่องมือ

โคลน E1L3N จับกับโดเมน C-terminal ภายในเซลล์ของ PD-L1 ซึ่งเป็นเหตุผลว่าทำไมจึงทนทานต่อโปรโตคอลการตรึงและการดึงที่หลากหลายได้ง่ายกว่าแอนติบอดี N-terminal บางชนิด แต่โคลนเพียงอย่างเดียวไม่สามารถรับประกันความสม่ำเสมอได้ ผลลัพธ์คือผลิตภัณฑ์ของแอนติบอดี เคมีตรวจจับ และเครื่องมือ ดังนั้น การทดสอบที่ใช้ E1L3N จึงต้องการการไทเทรตเฉพาะแพลตฟอร์มเพื่อกำหนดปริมาณการเจือจางที่เหมาะสมและหน้าต่างการดึงแอนติเจนบนเครื่องอัตโนมัติแต่ละเครื่อง และห้องปฏิบัติการที่ใช้ E1L3N บนหลายแพลตฟอร์มต้องแสดงให้เห็นว่า TPS และเกณฑ์เซลล์มะเร็งมีความสอดคล้องกัน

ข้อตกลงที่เกณฑ์ที่เกี่ยวข้องทางคลินิก เช่น TPS 1% และ 50% เป็นตัวชี้วัดหลัก เนื่องจากความคลาดเคลื่อนเล็กน้อยใกล้กับขอบเขตการตัดสินใจสามารถพลิกคุณสมบัติของผู้ป่วยได้ ห้องปฏิบัติการหลายแห่งเปรียบเทียบ E1L3N กับการทดสอบอ้างอิง 22C3 และ 28-8 บนเนื้อเยื่อจุลภาคที่จับคู่กัน ข้อตกลงโดยรวมสูงกว่า 90% เป็นเกณฑ์มาตรฐาน

สถาปัตยกรรมควบคุมคุณภาพ CAP/CLIA

ความสม่ำเสมอข้ามแพลตฟอร์มที่ยั่งยืนไม่ใช่เหตุการณ์การตรวจสอบความถูกต้องเพียงครั้งเดียว แต่เป็นวินัยที่ต่อเนื่องซึ่งบังคับใช้โดย CAP และ CLIA ห้องปฏิบัติการต้องล็อคตัวแปรก่อนการวิเคราะห์ — เวลาการตรึงด้วยฟอร์มาลิน ความหนาของสไลด์ และการดึงแอนติเจน — เนื่องจาก E1L3N เช่นเดียวกับโคลน PD-L1 ทั้งหมดมีความไวต่อการตรึงมากเกินไปและน้อยเกินไป การควบคุมบนสไลด์ที่มีการแสดงออกสูง ต่ำ และเป็นลบที่ทราบจะทำงานร่วมกับทุกชุดเพื่อยืนยันว่าการย้อมสีสะท้อนการแสดงออกที่แท้จริงแทนที่จะเป็นการคลาดเคลื่อน

ระบบคุณภาพยังต้องการการทดสอบความชำนาญ การตรวจสอบชุดต่อชุดของแอนติบอดีล็อตใหม่แต่ละล็อต และนโยบายการดำเนินการและทดสอบซ้ำที่กำหนด CLIA กำหนดความสามารถพื้นฐาน CAP เพิ่มการตรวจสอบโดยผู้เชี่ยวชาญและการสำรวจความชำนาญ สำหรับผู้ซื้อ ซัพพลายเออร์ที่เผยแพร่เมทริกซ์การตรวจสอบความถูกต้องอย่างโปร่งใส แสดงถึงโปรแกรมคุณภาพที่แข็งแกร่งพอที่จะปกป้องผลลัพธ์ PD-L1

คำถามที่พบบ่อย

ถาม: โคลน E1L3N สามารถใช้แทนที่การวินิจฉัยคู่หู 22C3 หรือ 28-8 ได้หรือไม่? ตอบ: ไม่ใช่โดยอัตโนมัติ E1L3N เป็นแอนติบอดีที่พัฒนาขึ้นในห้องปฏิบัติการซึ่งต้องได้รับการตรวจสอบความถูกต้องกับข้อมูลอ้างอิงก่อนที่ผลลัพธ์จะสามารถนำทางการตัดสินใจทางคลินิกได้ เมื่อสอบเทียบอย่างเหมาะสม จะแสดงความสอดคล้องกันสูงกับ 22C3 และ 28-8

ถาม: เราควรคาดหวังระดับความสอดคล้องใดระหว่าง E1L3N บนแพลตฟอร์ม IHC ที่แตกต่างกันสองแพลตฟอร์ม? ตอบ: โปรแกรมที่แข็งแกร่งมุ่งหวังข้อตกลงโดยรวมสูงกว่า 90% ที่เกณฑ์ TPS ที่เกี่ยวข้องทางคลินิกที่ 1% และ 50% ความเบี่ยงเบนเล็กน้อยในช่วงกลางเป็นที่ยอมรับได้หากไม่ข้ามขอบเขตการตัดสินใจ

ถาม: เหตุใด CAP/CLIA จึงกำหนดให้มีการควบคุมบนสไลด์ในการทดสอบ PD-L1 ทุกครั้ง? ตอบ: การย้อมสี PD-L1 มีความไวต่อความแปรปรวนของการตรึงและการดึง การควบคุมบนสไลด์ที่มีการแสดงออกสูง ต่ำ และเป็นลบที่ทราบจะจับความคลาดเคลื่อนของกระบวนการแบบเรียลไทม์ ดังนั้นผลลัพธ์จึงสามารถเชื่อถือได้ก็ต่อเมื่อการควบคุมการทดสอบทำงานตามที่คาดไว้

ถาม: การรับรอง CAP รับประกันว่าผลลัพธ์ E1L3N ของเราจะตรงกับห้องปฏิบัติการอ้างอิงหรือไม่? ตอบ: การรับรอง CAP รับประกันว่าห้องปฏิบัติการปฏิบัติตามกระบวนการที่มีระเบียบวินัยและผ่านการสำรวจความชำนาญ ซึ่งมีความสัมพันธ์อย่างมากกับข้อตกลงระหว่างห้องปฏิบัติการ ไม่ได้รับประกันตัวเลขที่เหมือนกันทุกประการ แต่เพิ่มโอกาสในการจำแนกประเภทที่สอดคล้องกันอย่างมาก