September 26, 2025
อย่างแน่นอน เทคโนโลยี mNGS (metagenomic next-generation sequencing) สามารถตรวจจับ DNA และ RNA ได้พร้อมกัน ซึ่งเป็นข้อดีที่สําคัญที่สุดของเทคโนโลยีนี้ เมื่อเทียบกับวิธีการทดสอบแบบดั้งเดิมการผสมผสานการทดสอบสําหรับโรคระบาดทั้ง DNA และ RNA มักจะเรียกว่า mNGS (สําหรับโรคระบาด DNA) + RNA-Seq (สําหรับโรคระบาด RNA), และในการปฏิบัติทางคลินิกมักเรียกว่า "การเรียงลําดับ metagenomic ของเชื้อโรค"
ข้อต่อไปนี้อธิบายหลักการ ข้อดี และกรณีการใช้ในรายละเอียด:
การตรวจจับร่วมกันไม่ใช่เพียงแค่การโยนตัวอย่างเข้าไปในเครื่องจักร มันต้องใช้กระบวนการห้องปฏิบัติการที่พิเศษ
การสกัดกรดนิวเคลียนตัวอย่าง: อย่างแรก, กรดนิวเคลียนทั้งหมด (รวมทั้ง DNA และ RNA) จะสกัดจากตัวอย่างทางคลินิก (เช่นเลือด, น้ํายาสมองหลัง,และน้ํายาล้างสะเก็ดเงินสะเก็ดเงิน) โดยใช้ชุดการสกัดพิเศษ.
การถ่ายทอดกลับ (ขั้นตอนสําคัญ): การถ่ายทอดกลับถูกเพิ่มเข้าไปในกรดนิวเคลียนทั้งหมดที่ถอนออกมา เพื่อถ่ายทอดกลับ RNA ทั้งหมด (ทั้งมนุษย์และโรค) เป็น DNA ที่สมบูรณ์แบบ (cDNA)
การสร้างห้องสมุดเรียงลําดับ: ในจุดนี้วัสดุพันธุกรรมทั้งหมดในตัวอย่างถูกแปลงเป็น DNA (DNA แท้ + cDNA ที่ถ่ายทอดกลับจาก RNA) DNA นี้ถูกแยกแยก,และประมวลผลโดยใช้ชุดก่อสร้างห้องสมุดทั่วไป เพื่อสร้างห้องสมุดพร้อมสําหรับการเรียงลําดับ.
การเรียงลําดับและการวิเคราะห์ชีวสารศาสตร์ที่ผ่านระดับสูง: หลังจากการเรียงลําดับห้องสมุดที่ผ่านระดับสูง, จํานวนข้อมูลที่เกิดขึ้นอย่างมากจะผ่านท่อชีวสารศาสตร์ที่เชี่ยวชาญ:
การกําจัดลําดับของมนุษย์: การกําจัดลําดับของพันธุกรรมมนุษย์ถูกจัดอันดับและกรองออกไปเพื่อลดปริมาณข้อมูลและปรับปรุงความรู้สึกในการวิเคราะห์
การเปรียบเทียบประเภทประเภท: การเปรียบเทียบลําดับที่เหลือกับฐานข้อมูลขนาดใหญ่ของจุลินทรีย์เชื้อโรค (รวมแบคทีเรีย ไวรัส DNA ไวรัส RNA ฟองกี้ ปรสิต และอื่น ๆ)
การผลิตรายงาน: การผลิตรายงาน โดยจัดรายชื่อเชื้อโรคที่สงสัยทั้งหมดที่พบ (รวมถึงไวรัส DNA และ RNA) และให้ข้อมูลการอ่านที่เกี่ยวข้อง
สเปคตรัมกว้างและไม่มีสมมุติฐาน: การกําจัดความจําเป็นของเชื้อโรคที่ระบุล่วงหน้า การทดสอบเพียงครั้งเดียวสามารถตรวจหาเชื้อโรคทั้งหมดในตัวอย่าง รวมถึงเชื้อไวรัสที่ไม่ทราบชื่อ, แพร่หลายและเกิดใหม่ (เช่นg., SARS-CoV-2 และไวรัส Bunyavirus ใหม่ที่ค้นพบผ่านเทคโนโลยีนี้)
มีประสิทธิภาพและครบวงจร: การทดสอบเพียงครั้งเดียวสามารถครอบคลุมเชื้อโรคเกือบทั้งหมด ทําให้มันเหมาะสําหรับการวินิจฉัยเชื้อราอย่างรวดเร็วในโรคที่รุนแรง ยากที่จะวินิจฉัย การติดเชื้อผสมและผู้ป่วยที่อาการภูมิคุ้มกันการหลีกเลี่ยงกระบวนการทดสอบ "หนึ่งต่อหนึ่ง" ที่ใช้เวลามาก
การค้นพบเชื้อโรคที่คาดไม่ถึง: เชื้อโรคที่ไม่เคยถูกพิจารณาทางการแพทย์มาก่อนมักจะถูกค้นพบ ซึ่งสามารถให้ความรู้ทางการวินิจฉัยใหม่ได้
เทคโนโลยีนี้โดยทั่วไปไม่ใช่ทางเลือกอันดับแรก แต่มีบทบาทสําคัญเมื่อวิธีการดั้งเดิมไม่สามารถระบุสาเหตุได้อย่างชัดเจน:
โรคไข้ที่เกิดจากที่ไม่ทราบ (FUO)
โรคติดเชื้อภายในสมองที่เกิดจากที่ไม่ทราบ (เช่นเส้นเลือดขอด, ไข้เชื้อสมอง)
โรคสะเก็ดเงินที่เกิดจากต้นตระกูลที่ไม่ทราบ (โดยเฉพาะในผู้ป่วยที่เจ็บป่วยหนักและโรคภูมิคุ้มกัน)
การวินิจฉัยเชื้อโรคเชื้อโรค
การวินิจฉัยโรคติดเชื้อทางโอกาส
ค่าใช้จ่ายสูง: การเรียงลําดับและการวิเคราะห์ข้อมูลมีค่าใช้จ่ายสูง
ความต้องการทางเทคนิคสูง: จําเป็นต้องใช้อุปกรณ์ปฏิบัติการ ระบบปฏิบัติการ และความสามารถในการวิเคราะห์ทางชีวสารศาสตร์ที่สูงมาก
ความยากลําบากในการแยกระหว่างการก่ออาณานิคมและการติดเชื้อ: การตรวจพบลําดับของจุลินทรีย์ไม่ได้รับการรับประกันว่ามันเป็นผู้กระทําผิดแพทย์แพทย์ต้องทําการประเมินอย่างครบถ้วน โดยพิจารณาจากอาการของผู้ป่วยสัญญาณ และผลการทดสอบอื่นๆ
ปัญหาความรู้สึก: ตัวอย่างบางตัวที่มีเชื้อโรคน้อยอาจไม่สามารถตรวจพบได้
โดยสรุปเทคโนโลยี mNGS ผ่านขั้นตอนสําคัญของ "การถ่ายทอดกลับ" ทําให้สามารถตรวจพบเชื้อรังโรคทั้ง DNA และ RNA ได้อย่างสําเร็จ It is a powerful and unbiased pathogen screening tool that plays an irreplaceable role in the diagnosis of difficult and critical infections and is an important advancement in modern medical diagnostic technology.
