ภาพรวม

การทดสอบการแสดงออกของยีน PD-L1 ในเลือดโดยใช้การตรวจวัดปริมาณสารเรืองแสงด้วย PCR ทำให้การทดสอบไบโอมาร์คเกอร์ภูมิคุ้มกันเข้าถึงผู้ป่วยที่ไม่สามารถให้เนื้อเยื่อได้ เรื่องราวการกำกับดูแลเกี่ยวข้องกับการตรวจสอบความถูกต้องสำหรับรูปแบบของเหลว: วิธีการต้องพิสูจน์ว่าสามารถติดตาม PD-L1 ในเนื้อเยื่อได้อย่างใกล้ชิดเพียงพอที่จะนำทางการรักษา สำหรับผู้จัดจำหน่าย คำถามสำคัญในการจัดซื้อคือห้องปฏิบัติการมีการตรวจสอบความถูกต้องที่เปรียบเทียบผลเลือดกับ IHC ที่ตรงกันในผู้ป่วยรายเดียวกันหรือไม่ ผลลัพธ์ของเหลวจะได้รับตำแหน่งในการรักษาเมื่อได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสอดคล้องกับเนื้อเยื่อในกรณีที่เพียงพอที่จะเชื่อถือเกณฑ์

วิธีการทำงาน

สกัด RNA จากเลือดทั้งหมด, ถอดรหัสกลับ, และเพิ่มปริมาณด้วย PCR เรืองแสงสำหรับเป้าหมายทรานสคริปต์ PD-L1 พร้อมกับตัวอ้างอิงภายใน ค่ารอบเกณฑ์จะถูกแปลงเป็นระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ เนื่องจากไม่มีการย้อมสี การให้คะแนนจึงขับเคลื่อนด้วยเครื่องมือและสามารถทำซ้ำได้ ซึ่งช่วยให้ความสอดคล้องกันระหว่างไซต์และระหว่างประเทศง่ายขึ้น การควบคุมการสกัดยืนยันคุณภาพ RNA ก่อนการเพิ่มปริมาณ โดยบล็อกตัวอย่างที่จะให้สัญญาณต่ำที่ทำให้เข้าใจผิด

ข้อบ่งชี้ทางคลินิก

ระบุไว้เมื่อไม่มีเนื้อเยื่อหรือเมื่อต้องการอ่านค่า PD-L1 ซ้ำโดยไม่ต้องทำการตัดชิ้นเนื้ออีก ทีมเนื้องอกวิทยาใช้เป็นสัญญาณเสริมควบคู่ไปกับการถ่ายภาพและ IHC ก่อนหน้า โปรแกรมยังใช้เพื่อติดตามการแสดงออกเมื่อเวลาผ่านไป เนื่องจากสามารถเจาะเลือดซ้ำได้ง่ายกว่าการตัดชิ้นเนื้อใหม่

ตัวอย่างและการดำเนินการ

ต้องใช้หลอดเลือด EDTA ขนาด 2-3 มล.; หลีกเลี่ยงภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเมื่อเจาะเลือด รายงานจะให้ค่าการแสดงออกสัมพัทธ์พร้อมระบุชื่อวิธี PCR และหมายเหตุบริบทของไบโอพซีของเหลว การดำเนินการรวดเร็วเนื่องจากขั้นตอนการทำงานมีขั้นตอนที่ต้องทำด้วยมือเพียงไม่กี่ขั้นตอน ซึ่งเหมาะสำหรับผลลัพธ์ที่แจ้งการพูดคุยเกี่ยวกับการรักษาในระยะใกล้

การจัดเก็บและโลจิสติกส์

เลือดจะถูกจัดส่งแบบแช่เย็นพร้อมแพ็คความเย็น ความเสถียรของ RNA ได้รับการปกป้องโดยการดำเนินการอย่างรวดเร็ว ห้องปฏิบัติการบริการจะบันทึกการทำงานของ PCR ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วเพื่อให้พันธมิตรต่างประเทศมีมาตรฐานคุณภาพเดียวกัน รีเอเจนต์ที่ควบคุมด้วยล็อตและเส้นโค้งการเพิ่มปริมาณที่บันทึกไว้ช่วยให้ผู้ตรวจสอบสามารถตรวจสอบย้อนกลับได้ตามที่ไบโอพซีของเหลวที่ได้รับการควบคุมคาดหวัง ฉลากผู้จัดส่งแบบชำระเงินล่วงหน้าช่วยรักษาห่วงโซ่ความเย็นไม่ให้ขาดตอนตั้งแต่การเจาะเลือดจนถึงห้องปฏิบัติการ ซึ่งช่วยปกป้อง RNA ในเส้นทางระหว่างประเทศที่ยาวนาน

คำถามที่พบบ่อย

ถาม: ทำไมต้องใช้ PCR ในเลือดแทน IHC ในเนื้อเยื่อ? ตอบ: เข้าถึงผู้ป่วยได้โดยไม่ต้องตัดชิ้นเนื้อและให้คะแนนที่อิงตามเครื่องมือและสามารถทำซ้ำได้ การเจาะเลือดซ้ำทำได้ง่าย จึงสามารถติดตามการแสดงออกเมื่อเวลาผ่านไปได้

ถาม: มันใช้แทน 22C3 IHC ได้หรือไม่? ตอบ: ไม่ มันเป็นส่วนเสริมและรายงานในบริบทของไบโอพซีของเหลว ค่าเลือดควรถูกอ่านควบคู่ไปกับประวัติเนื้อเยื่อ ไม่ใช่แทนที่

ถาม: ตัวอย่างจะคงความเสถียรได้อย่างไร? ตอบ: เลือด EDTA แช่เย็นพร้อมแพ็คความเย็น ดำเนินการอย่างรวดเร็วเพื่อปกป้อง RNA หลีกเลี่ยงภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเมื่อเจาะเลือด เนื่องจากเซลล์ที่แตกอาจทำให้การอ่านค่าการแสดงออกผิดเพี้ยนได้